无菌检查的定义以及局限性

2015-02-16 16:21:15 admin

无菌检查的定义以及局限性

GMP微生物灭菌的专业知识无菌”从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发展的今天，药品的绝对无菌是做不到的，也无法加以证实。然而，无菌制剂的安全性要求人们设定无菌的相对标准。FDA、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品“无菌”的相对标准，它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为10-6（即产品的无菌保证值为6），系同一标准的不同表示法。这一标准于1980起收录于USP 中，如今已为世界各国普遍接受和采用。

     无菌检查基本定义：检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料、以及要求无菌的其他物品是否染有活菌的一种方法。
    符合无菌检查法的规定仅表明了供试品在该检验条件下未发现细菌和真菌污染。
    无菌检查法是建立在批产品受微生物污染是均匀的假设上。即使该批产品的污染非常均匀，检出低污染的概率也是极低的。因此，无菌检查存在风险和局限性。应尽量抽取批产品生产开始、结束或生产过程出现异常情况下的产品进行检查。

    药品生产中的污染来源
    人员
    在100级洁净区或万级背景下的局部100级洁净区。人是无菌药品生产中的主要污染源，即使在管理比较到位，生产设备自动化程度较好，操作人员素质较高的企业，人员操作所致的污染率也超过70%。
    水源性微生物
    绝大多数为革兰氏阴性菌，不会形成芽孢，不耐热。其代谢产物及细胞的尸体及碎片均属细胞内毒素的污染源空气中的微生物基本为革兰氏阳性菌，有可能会形成芽孢使其耐热性增大。

   无菌检查的局限性
   无菌的定义
    理论上：无菌＝没有任何活的微生物；实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在。
    无法对整批产品进行100%检验无菌检验的结果只是一个基于“可能性”的判断。无菌检验用培养基有其局限性对实验结果的判定是基于“是否在培养基中生长”；培养条件（如温度和时间）是有限的；我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态。

    无菌保证工艺：
    无菌保证工艺即：使产品达到规定的无菌保证水平的工艺过程。无菌保证工艺可分为两大类：最终灭菌工艺（terminal sterilization process）和非最终菌生产工艺（aseptic processing）。
    最终灭菌工艺系指将完成最终密封的产品进行灭菌，以杀灭产品中的微生物的工艺。由此生产的无菌制剂称为最终灭菌无菌药品。我国和国际主要药典规定通过最终灭菌使这类药品中污染的微生物残存概率下降致不高于10-6的水平，以SAL≤10-6表示。应通过灭菌工艺验证确认已灭菌产品的无菌保证水平。

    非最终灭菌工艺非最终灭菌工艺系指在无菌环境条件下通过无菌操作生产无菌产品的方法。具体就是将组成药品的原料和包装材料分别灭菌或经除菌处理，在无菌条件下将其组装成成品的工艺。经该工艺生产的无菌制剂称为非最终灭菌的无菌药品。世界卫生组织、欧盟以及美国FDA等对非最终灭菌的无菌药品的无菌保证水平分别作出了规定。目前WHO、欧盟和我国送审稿GMP执行的标准是95%可信限下微生物残存概率不超过0.1%，大致相当于3000瓶产品中不得有1瓶染菌的水平。美国FDA的标准要求更为严格，通俗的表达为5000瓶产品中不得有１瓶染菌。必须通过培养基灌装模拟试验来验证生产工艺能达到上述标准。